Περιεχόμενο
Μελέτες με μικροβιακές καλλιέργειες συχνά απαιτούν την ταυτοποίηση οργανισμών που υπάρχουν σε αυτές. Όταν ένα μικρό μέρος μιας καλλιέργειας εισάγεται σε άγαρ που περιέχει ένα θρεπτικό μέσο, είναι δυνατόν να διαχωριστεί μια μάζα βακτηρίων σε μεμονωμένες μονάδες σχηματισμού αποικιών. Κάθε μία από αυτές τις μονάδες αναπτύσσεται σε διακριτές αποικίες, οι οποίες δείχνουν χαρακτηριστικά που βοηθούν στον εντοπισμό του οργανισμού.
Σκοπός
Οι μελέτες μικροβιολογίας απαιτούν τη μελέτη της μορφολογίας συγκεκριμένων οργανισμών. Σε ορισμένες περιπτώσεις, οι οργανισμοί που υπάρχουν σε μια μικτή καλλιέργεια πρέπει να διαχωριστούν πριν μπορέσουν να αναλυθούν. Έτσι, είναι σημαντικό να απομονωθούν αυτές οι μικροβιακές αποικίες. Οι βακτηριακές καλλιέργειες περιέχουν μεγάλο αριθμό κυττάρων σε μία σταγόνα. Η σπορά με εξάντληση σε πλάκα άγαρ τα αραιώνει, έτσι ώστε ένα μόνο βακτηριακό κύτταρο να εναποτίθεται σε μια συγκεκριμένη περιοχή της πλάκας. Αρκετά από αυτά τα μεμονωμένα κύτταρα διαχωρίζονται από μερικά χιλιοστά στο μεταξύ. Καθένα από αυτά χωρίζεται για να σχηματίσει χιλιάδες νέα κελιά, δημιουργώντας απομονωμένες αποικίες.
Αρχή
Η πλάκα άγαρ παρέχει ένα μέσο πλούσιο σε θρεπτικά συστατικά που διεγείρει την ανάπτυξη και τον πολλαπλασιασμό των μικροοργανισμών. Η σπορά λυμάτων χρησιμοποιεί τη μέθοδο ραβδώσεων τεταρτημορίων, στην οποία ολόκληρη η πλάκα χωρίζεται σε τέσσερα τεταρτημόρια. Καθώς μετακινείστε από το ένα τεταρτημόριο στο άλλο, υπάρχει σταδιακή αραίωση της αρχικής καλλιέργειας σε ολόκληρη τη διαθέσιμη επιφάνεια. Το τεταρτημόριο που ξεκινάτε δείχνει πυκνή και αδιακρίτως μικροβιακή ανάπτυξη, η οποία μοιάζει με χαλί μικροοργανισμών, ενώ το τελευταίο δείχνει απομονωμένες αποικίες.
Υλικά
Η σπορά καυσαερίων απαιτεί πλάκες άγαρ θρεπτικών ουσιών, έναν βρόχο για εμβολιασμό, την καλλιέργεια των βακτηρίων, ένα απολυμαντικό διάλυμα, όπως το Lysol 10%, και έναν καυστήρα Bunsen. Θα χρειαστείτε επίσης εξοπλισμό ασφαλείας, όπως ποδιά, γάντια και προστατευτικά γυαλιά. Το εμβόλιο για το σχηματισμό ραγάδων γίνεται από την καλλιέργεια βακτηρίων χρησιμοποιώντας το βρόχο και ξύσιμο των τρυβλίων θρεπτικών άγαρ. Ο καυστήρας Bunsen προορίζεται για φλόγα της λαβής κατά τη διάρκεια των αυλακώσεων. Χρησιμοποιήστε το απολυμαντικό διάλυμα για να καθαρίσετε την επιφάνεια πριν ξεκινήσετε το πείραμα.
Μέθοδος
Χρησιμοποιήστε μια μικρή ποσότητα εμβολίου για σπορά στο πρώτο τεταρτημόριο με κίνηση εμπρός και πίσω. Φλόγα τη λαβή και αφήστε την να κρυώσει, αγγίζοντας την σε ένα μέρος της πλάκας άγαρ που δεν έχει εμβολιαστεί. Αγγίξτε το στο ένα άκρο της περιοχής που μόλις σπείρατε και τεντώστε το από εκεί στο δεύτερο τεταρτημόριο. Φλόγα και ψύξτε το βρόχο ξανά, και από τη δεύτερη περιοχή, λειτουργήστε το τρίτο τεταρτημόριο. Επαναλάβετε την ίδια διαδικασία με το τέταρτο τεταρτημόριο.
