Περιεχόμενο
Οι μικροβιολόγοι μελετούν τα χαρακτηριστικά μικροοργανισμών, όπως φύκια, βακτήρια, πρωτόζωα, μύκητες και ιούς, χρησιμοποιώντας μικροσκόπιο. Αν και ορισμένοι οργανισμοί, όπως τα πρωτόζωα και τα κύτταρα ζύμης είναι ευδιάκριτα μέσω των διαφανειών, τα βακτηριακά κύτταρα απαιτούν χρώση. Οι επιστήμονες έχουν αναπτύξει διάφορες μεθόδους, όπως η τεχνική χρώσης Gram, η αντοχή σε οξύ και η φθορίζουσα χρώση για τη βελτίωση της οπτικοποίησης βακτηριακών κυττάρων και κυτταρικών δομών. Χρησιμοποιώντας τέτοιες μεθόδους χρώσης, είναι δυνατό να προσδιοριστούν τα δομικά χαρακτηριστικά που βοηθούν στην ταξινόμηση των βακτηρίων.
Καλύτερη προβολή
Οι βακτηριακοί οργανισμοί είναι τόσο μικροί που οι περισσότεροι από αυτούς είναι ορατοί μόνο κάτω από το μικροσκόπιο με δύναμη μεγέθυνσης 1000 φορές. Ωστόσο, η απλή αύξηση του μεγέθους δεν παρέχει επαρκή βαθμό σαφήνειας, επομένως τα βακτήρια πρέπει επομένως να χρωματιστούν πριν από την παρατήρηση για να παρέχουν τη σαφήνεια που απαιτείται για την οπτικοποίηση.
Ταυτοποίηση και ταξινόμηση
Η βαφή βακτηρίων για διάκριση μεταξύ τύπων βακτηρίων είναι γνωστή ως διαφορική χρώση. Το Gram stain είναι ένας διαφορικός λεκές που διακρίνει τα βακτήρια ανάλογα με την περιεκτικότητα του κυτταρικού τοιχώματος. Σε αυτή τη μέθοδο, τα βακτηριακά κύτταρα αντιδρούν με μια κρυσταλλική βιολετί βαφή για να μετατραπεί σε βιολετί. Μέσω της προσθήκης λευκαντικού παράγοντα, ορισμένα βακτηριακά κύτταρα χάνουν το χρώμα τους, ενώ άλλα όχι. Μέσω της προσθήκης βαφής σαφραίνης, τα αποχρωματισμένα κύτταρα γίνονται ερυθρά, ενώ τα βακτηριακά κύτταρα που δεν χάνουν χρώμα παραμένουν βιολετί. Τα κύτταρα που γίνονται κόκκινα ονομάζονται αρνητικοί κατά gram οργανισμοί και τα κύτταρα που δεν γίνονται κόκκινα ταξινομούνται ως θετικοί κατά gram οργανισμοί. Η τεχνική χρώσης Gram παρέχει μια γρήγορη μέθοδο για την αρχική αναγνώριση των βακτηρίων που εμπλέκονται σε λοιμώξεις. Ομοίως, η ανθεκτική στα οξέα διαδικασία χρώσης βοηθά στον προσδιορισμό συγκεκριμένων οργανισμών που ανήκουν στην κατηγορία βακτηρίων που ονομάζονται μυκοβακτήρια, όπως το Mycobacterium tuberculosis.
Ανίχνευση σκοπιμότητας
Σε δείγματα βακτηριακών καλλιεργειών, είναι συχνά σημαντικό να ανιχνεύεται η παρουσία ζωντανών βακτηριακών κυττάρων. Μέθοδοι όπως η φθορίζουσα χρώση βοηθούν στον προσδιορισμό του εάν τα κύτταρα καλλιέργειας είναι βιώσιμα ή όχι. Τα ζωντανά βακτήρια έχουν τη δυνατότητα να μετατρέπουν το τετραζολίου 5-κυανο-2,3-διτολυλοχλωρίδιο (CTC) σε μια βαφή που εμφανίζει έναν κόκκινο φθορισμό. Επομένως, όταν οι καλλιέργειες χρώματος CTC εκπέμπουν αυτούς τους φθορισμούς, αυτό δείχνει την παρουσία βιώσιμων βακτηρίων. Το ιωδιούχο προπίδιο είναι ένας λεκές που δρα μόνο σε μη ζωντανά κύτταρα που έχουν υποστεί βλάβη στις μεμβράνες και επομένως είναι χρήσιμο στην ταυτοποίηση νεκρών βακτηριακών κυττάρων.
Αναγνώριση κυτταρικών δομών
Η χρώση παρέχει μια μέθοδο σαφούς οπτικοποίησης διαφόρων κυτταρικών δομών. Για παράδειγμα, η μέθοδος χρώσης Feulgen επιτρέπει την αναγνώριση του πυρήνα εντός βακτηριακών κυττάρων, ενώ η χρώση Albert είναι χρήσιμη στην οπτικοποίηση των μεταχρωματικών κόκκων. Ομοίως, η τεχνική εμποτισμού αργύρου επιτρέπει την ταυτοποίηση των σπιροχέτων. Τα Flagella είναι εύκολο να παρατηρηθούν όταν είναι χρωματισμένα με το χρωματισμό του Ryu. Η χρώση με πράσινο μαλαχίτη βοηθά στον εντοπισμό βακτηριακών σπόρων.
